《表1 RT-PCR引物信息》

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《基于网络药理学探讨桃莲绞复方增强全成分肿瘤细胞疫苗抗结直肠癌作用分子机制》

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各组肿瘤组织匀浆，采用总RNA提取试剂盒提取得到肿瘤匀浆组织总RNA，Fast Quant c DNA第一链合成试剂盒对总RNA进行反转录得到c DNA，配制反应体系：2×Super Real Pre Mix Plus 10μL，β-actin/IFNGR1/JAK1/JAK2/STAT1正向引物（10μmol/L)0.6μL，β-actin/IFNGR1/JAK1/JAK2/STAT1反向引物（10μmol/L)0.6μL，c DNA模板1μL，50×RO×Reference Dye 1μL，RNase-free dd H2O 6.8μL。将反应体系置于荧光定量PCR仪中进行扩增，采用2-△△Ct分析方法，每个标本重复3次，Ct值取平均值，IFNGR1、JAK1、JAK2、STAT1为目的基因，β-actin为内参基因，Vaccine组作为对照组，△Ct值=目的基因Ct值-内参基因Ct值，△△Ct值=TLF+Vaccine组△Ct值-Vaccine组△Ct平均值。以Vaccine组目的基因表达量为1，2-△△Ct即为TLF+Vaccine组相对Vaccine组目的基因表达的倍数。所用引物见表1。