《表1 RT-PCR检测引物信息表》

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《基于“热证可灸”研究麦粒灸对胃热证大鼠胃黏膜屏障的影响》

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称取约100 mg组织样品，加液氮研磨，用1 m L trizol室温裂解5 min，4℃12 000 rpm离心10 min；取上清，按常规方法提取总RNA，随后进行RNA浓度测定，取1μL进行逆转录，总体系10μL，制备cDNA模板。按照说明书进行TFF2 mRNA、TNF-αmRNA的RT-PCR检测，以β肌动蛋白（β-actin）为内参基因，引物序列见表1，用两步法进行PCR扩增，测定TFF2 mRNA、TNF-αmR-NA表达Ct值，将获得目的基因Ct值减去内参基因Ct值，得到△Ct值后，采用2-△△Ct方法[9]分析mRNA相对表达量。