《表1 RT-PCR检测引物》

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《4-羟基苯乙酸对M1型巨噬细胞极化及巨噬细胞泡沫化的影响》


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RAW264.7巨噬细胞按1. 2.2和1.2.3造模和分组作用24h后,倾去培养液,用预冷的PBS洗3次,Trizol试剂提取细胞总RNA,用Takara逆转录试剂盒进行逆转录反应cDNA,并采用实时荧光定量PCR仪检测基因(IL-6、TNF-α、IL-1β、ABCA1、ABCG1和CD36)的表达量。实时荧光定量PCR条件为95.0℃预变性5min;95.0℃变性30s,60.0℃退火30s,72.0℃延伸1min,30个循环,每个循环结束前系统自动检测荧光产物的量,所有循环结束后,绘制溶解曲线以判断扩增产物的特异性。以β-actin作为内参,采用2-ΔΔCt法分析基因的相对表达量。引物由广州锐博生物科技公司设计并合成(见表1)。