《表1 NDM-1的酶动力学参数》

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《基于结构设计的三肽分子对NDM-1的抑制活性研究》

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实验室前期已构建好p ET-28a-NDM-1-E.coli BL21（DE3）的重组菌株（NDM-1的N端添加了His-tag以便后续纯化），在20℃下诱导表达20h后收集菌体，经超声破碎后对上清中的NDM-1采用镍柱亲和层析法进行分离、纯化，纯化结果如图2所示。以青霉素（氨苄西林）、头孢菌素（头孢呋辛、头孢唑肟）及碳青霉烯类（美罗培南）抗生素为底物，测定NDM-1水解动力学参数见表1。结果显示NDM-1对经典青霉素类抗生素氨苄西林的水解速率（Kcat）最高，对头孢呋辛的水解速率最低，故后续抑制剂活性测定的底物选择头孢呋辛。