《表1 RT-PCR引物序列》

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《外泌体lncRNA干扰素诱导GTP酶假基因1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义》

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注：H表示人源，M表示鼠源，GVINP1为干扰素诱导GTP酶假基因1

采用RT-PCR法。按照Trizol试剂说明书提取总RNA，分别将血浆和细胞选择性培养基外泌体RNA溶于焦碳酸二乙酯（DEPC）水，经NanoDrop 2000检测总RNA的质量和纯度，用5×PrimeScript RT Master Mix(Perfect Real Time）逆转录成cDNA。合成的cDNA利用SYBR GreenTM Premix Ex TaqTM(Tli RNaseH Plus）进行PCR扩增，20μl反应体系包括10μl SYBR GreenTMPremix Ex TaqTM(Tli RNaseH Plus）、0.6μl上游引物、0.6μl下游引物和50 ng cDNA；反应程序为95℃10 min；95℃15 s，60℃30 s，40个循环；95℃15 s，60℃30 s，95℃15 s。PCR扩增结束后，采用2-ΔΔCt法计算GVINP1及炎症因子mRNA表达水平，每个样本设3个平行孔。所用引物序列见表1。