《表2 候选内参基因的扩增效率Table 2Amplification efficiency of six candidate reference genes》

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《蚬壳花椒种子萌发时期内参基因的筛选与验证》


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根据已知的候选内参基因序列分析,设计溶解温度值在58~62℃之间的特异性引物。以5倍浓度梯度稀释的c DNA为模板,进行qRT-PCR扩增,根据获得的数据作6个候选内参基因的标准曲线。结果显示各候选内参基因的决定系数R2≥0.969,引物的扩增效率在91.99%~104.0%之间,均符合qRT-PCR对扩增效率的要求(表2)。分析溶解曲线发现各内参基因都只产生单一的溶解峰,各重复样品间的曲线重复性好(图1)。上述结果说明所设计引物的特异性良好,qRT-PCR反应专一性高,结果准确可靠。