《表4 用Best Keeper软件分析6个候选内参基因的表达稳定性Table 4Expression stability of six candidate reference genes analy

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《蚬壳花椒种子萌发时期内参基因的筛选与验证》

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Best Keeper分析的原理是直接将候选内参基因的Ct值用EXCEL软件计算标准差（s）。一般s值越小，基因的表达稳定性越好。当s值>1时表明该基因表达不稳定。本研究分析结果（表4）显示，GAPDH和TUA的s值大于1，其余都小于1；其中ACT的s最小，表明ACT的表达稳定性最好。按照稳定性从高到低排序依次为ACT>UBQ5>CYP>18SrRNA>TUA>GAPDH。2.4.3 Norm Finder分析Norm Finder程序依据相对表达量用EXCEL软件计算基因的稳定值M。M值越低，则该基因越稳定。6个候选内参基因的M值如表5所示。表5结果表明，UBQ5的M值最低，说明它是所选内参基因中稳定性最好的；TUA的M值最高，说明它的稳定性最差。6个候选内参基因按照稳定性从高到低排序依次为UBQ5>ACT>18SrRNA>CYP>GAPDH>TUA。