《表1 精细定位所用分子标记》

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《大豆分枝数相关分子标记开发及qBN-18位点精细定位》


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从Soy Base数据库(https://soybase.org/)中选择位于大豆18号染色体定位区间内的55对SSR标记,由博迈德生物技术有限公司合成,用KN24和KF19进行多态性引物筛选(表1)。PCR总反应体系为20μL,包括10×Easy Taq buffer 2.0μL、2.5 mmol L-1 d NTPs1.5μL、无菌水12.3μL、Easy Taq酶0.2μL、引物(2μmol L-1) 2.0μL和DNA(70 ngμL-1)2.0μL。反应程序为95℃5 min;95℃30 s,55℃30 s,72℃30 s,34个循环;72℃5 min,4℃保存。用6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测SSR标记的扩增产物。