《表1 酿酒酵母亚细胞结构标记蛋白分组》

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《酵母亚细胞结构分离效率评估菌株的构建》

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选择11种蛋白质分别作为细胞核、内质网、早高尔基体、晚高尔基体、内体、液泡、线粒体、过氧化物酶体、脂滴、自噬体及质膜的标记蛋白（表1）。将这11种蛋白依据大小分为4组，每组蛋白用不同的蛋白标签标记。质粒构建:从酵母基因组分别克隆得到上述11种蛋白的基因序列，将这些基因序列同源重组至有特定蛋白标签的载体上（表2）。在完成上述11个质粒构建之后，以相同的方法将有相同标签的小质粒整合为一个大质粒。为确保每个大质粒的2～3个蛋白可以同时通过Western Blot检测，适当增加蛋白标签数目来调整融合蛋白的大小（表3）。最后将得到的4个大质粒同时转入酿酒酵母TN124 （MATa leu2 ura3 trp1 pho8Δ60 pho13Δ::LEU2）[35]。表4是实验所用的菌株。