《表1 单增李斯特菌血清分型引物》
单增李斯特菌的血清分型参照Doumith等[7]建立的多重PCR的方法进行。细菌DNA提取按照试剂盒说明书进行;血清分型引物见表1;多重PCR扩增体系(50μL):2×Taq Master Mix 25μL,lmo0737、orf2819、orf2110的上下游引物(10μmol/L)各1μL,lmo1118引物(10μmol/L) 1.5μL,prs引物(10μmol/L) 0.5μL,DNA模板2μL,灭菌水补齐至50μL;扩增条件:94℃预变性3 min;94℃变性30 s,53℃退火69 s,72℃延伸,35个循环;72℃延伸7 min[8]。用2%的琼脂糖胶块对PCR产物对进行电泳,溴化乙锭(Et Br,EB)染色,用Gel Doc EZ获取图像,对条带进行分析,判断血清型,并且与按照单增李斯特菌诊断血清试剂盒说明操作,进行血清型对比。
图表编号 | XD00225488300 严禁用于非法目的 |
---|---|
绘制时间 | 2020.10.25 |
作者 | 钱晶、杜冬冬、刘玉霞、殷月兰、王国红、罗瑞峰、黄新、张星星、康立超 |
绘制单位 | 新疆农垦科学院农业质量标准与检测技术研究所、新疆农垦科学院农业质量标准与检测技术研究所、新疆生产建设兵团疾病预防控制中心、江苏省人兽共患病学重点实验室、新疆农垦科学院农业质量标准与检测技术研究所、新疆农垦科学院农业质量标准与检测技术研究所、新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室、新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室、新疆农垦科学院农业质量标准与检测技术研究所、新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |