《表3 引物序列及产物大小》

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《基于动物实验的环境健康风险评价模型在白洋淀水质监测中的应用》


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采血后用脊椎脱臼法处死动物,迅速采集各器官,清理干净后,以10%中性福尔马林溶液固定24h,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋后以手动轮转式石蜡切片机切4μm薄片,H&E染色,在200倍光镜下进行观察。Real-time PCR法检测胃组织中IL-1、IL-17,肝组织TNF-α、NF-κB和肾NF-κB、IL-6的mRNA表达,Trizol提取各组织样本中总RNA,检测RNA的浓度和质量;按照试剂盒说明书进行逆转录反应,将反应所得cDNA产物用于后续PCR。反应步骤如下:95℃15min,95℃10s,53~58℃30s,72℃30s,循环40次。以β-actin为内参基因,用荧光定量PCR仪测定样本CT值,用2-△△CT法进行相对定量分析表征基因相对表达水平。引物序列及产物大小见表3。