《表1 引物序列及产物大小》

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《大肠杆菌DNA定性标准物质的制备及在枸杞子污染检测中的应用》

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取大肠杆菌菌液1 mL，12 000 r/min，4℃离心2 min，弃上清液，按照细菌基因组DNA提取试剂盒的操作步骤提取大肠杆菌基因组DNA。对大肠杆菌中毒力基因escV、stx2和hlyA进行PCR反应体系和反应程序的优化，并对所建立的PCR反应进行特异性和灵敏度实验。用金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌、沙门氏菌和单核细胞性李斯特菌进行引物特异性实验。将提取的大肠杆菌全基因组DNA进行10倍梯度倍比稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5和10-6系列浓度，进行检测灵敏度实验，将同一批不同稀释度的稀释液按建立的方法进行3次重复实验，分析此方法的重复性。