《表1 引物序列及产物大小》

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《血管内皮生长因子165对HEK293细胞KCNQ1/KCNE1电流的影响及其机制研究》


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3组HEK293细胞均进行RNA提取,吸去培养基,加入Trizol,经吹打、离心后,取2.5μL上述RNA样品测浓度及A260/280,比值为1.8~2.0表示RNA质量较好,-80℃保存备用。应用反转录试剂盒将RNA反转录成cDNA,PCR引物由金唯智生物科技有限公司合成,引物序列见表1。PCR反应体系:共25μL,包括10×PCR Buffer 2.5μL,dNTP混合物1μL,10μmol/L上游引物1μL,10μmol/L下游引物1μL,Taq酶0.2μL,cDNA template 1μL,双蒸水18.3μL。PCR反应条件:94℃5 min;94℃30s,60℃30s,72℃40s,26个循环;72℃5min。