《表1 引物序列:小檗碱对牙髓干细胞MAPK/ERK信号通路及成牙本质向分化的影响研究》

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《小檗碱对牙髓干细胞MAPK/ERK信号通路及成牙本质向分化的影响研究》


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注:ALP为碱性磷酸酶;DSPP为牙本质涎磷蛋白;OPN为骨桥蛋白;GAPDH为甘油醛-3-磷酸脱氢酶

细胞接种于6孔板中,按1.3分组处理14 d,RNA提取试剂盒提取总RNA,逆转录c DNA试剂盒合成c DNA,q RT-PCR仪检测细胞中ALP、DSPP、OPN m RNA水平,以GAPDH为内参,PCR引物序列见表1。反应体系:2×SYBR Green q PCR Mastermix 10μL,dd H2O 7.8μL,c DNA(30 ng/μL)1μL,上、下游引物各0.6μL。反应条件:94℃、90 s;95℃、40 s,62℃、60 s,共45个循环。2-ΔΔCt法计算ALP、DSPP、OPN m RNA相对表达水平。设置6个平行孔。