《表2 荧光定量PCR引物信息》

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《cel-EIIB蛋白调控罗非鱼无乳链球菌强毒、弱毒株毒力相关基因的表达模式》

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注:a为16S r RNA基因；b为PTS系统的基因；c为TCS系统的基因；d为毒力基因.

根据Gene Bank上无乳链球菌的TCS系统、PTS系统及毒力基因序列信息，使用Primer 3.0软件设计特异性引物（表2），采用TB GreenT M Premix Ex TaqTM（Tli RNase H Plus)试剂盒，在实时荧光定量仪Light Cycler 480进行荧光定量PCR。反应总体系（10μL）为:TB Green Premix Ex Taq （Tli RNase H Plus）(2×）5μL，PCR forward primer 0.2μL，PCR reserve primer 0.2μL，c DNA模板1μL，dd H2O 4.6μL。每个样品设置3个生物学重复。