《表1 玉米CMS专性鉴定引物》

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《玉米雄性不育系晋玉1A的选育及其特性》

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在3叶期时，取晋玉1A、郑58、昌7-2、Jn A、B73的叶片，采用CTAB法提取玉米基因组DNA。其中，郑58为晋玉1A的保持系，昌7-2为晋玉1A的细胞质来源，B73为阴性对照，Jn A为CMS-S型雄性不育系的阳性对照（由山西省农业科学院高粱研究所在1996年发现的玉米不育系材料）。经过专效恢复系分组鉴定、细胞学形态观察、F1代花粉染色观察，确定Jn A为S型细胞质雄性不育[14-15]。参照LIU等[16]方法设计CMS专性鉴定引物CMST-F/R、CMSC-F/R和CMSS-F/R；参照郑用琏等[17]专利设计玉米CMS专性鉴定引物CMST-1/2、CMSC-1/2和CMSS-1/2（表1）。PCR反应体系为10×Buffer 2μL、2.5 mmol·L-1d NTPs 2μL、10 mmol·L-1引物各0.6μL、Taq酶0.3μL、DNA模板2μL，加dd H2O至20μL。反应程序为94℃2 min；94℃30 s，60℃30 s，72℃1 min，30个循环；72℃10 min，4℃保存。用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。