《表1 引物序列:玉米阳离子/质子逆向转运蛋白ZmNHX7的功能鉴定》

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《玉米阳离子/质子逆向转运蛋白ZmNHX7的功能鉴定》


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取玉米B73材料V1(第1片叶完全展开)时期的根和叶,V7(第7片叶完全展开)和R2(籽粒建成)时期根、茎、叶,以及苞叶、穗轴、雄穗、花丝、籽粒等部位样品,置液氮中速冻,使用植物总RNA提取试剂盒(北京天根生化科技公司,Cat#DP432)提取上述样品总RNA,利用反转录试剂盒(北京全式金生物科技有限公司,Cat#AU311-03)反转录为cDNA,以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR[21]。实时荧光定量PCR以玉米组成型基因GAPDH为内参(表1),设计ZmNHX7基因的特异性引物(ZmNHX7-Q-F/R)(表1),每个样品设计3个生物学重复,在Applied Biosystems 7300实时荧光定量PCR仪上分析,导出CT值,用2–ΔΔCT公式计算获取定量结果。