《表1 实时定量PCR引物序列》

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《碳酸酐酶1在非小细胞肺癌早期发病中作用机制的研究》

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按照RNAiso Plus试剂说明书提取细胞总RNA。经NanodropTM2000分光光度计检测A260/280比值，确定RNA纯度及浓度，采用RNA电泳检测RNA完整性。依据M-MLV-Reverse逆转录酶说明书，进行RNA逆转录。采用Bright Green 2×q PCR Master Mix-ROX在ABI 7500实时荧光定量PCR系统检测基因表达水平。PCR反应条件为50℃2 min；95℃5 min；95℃15 s，60℃40 s，40个循环。采用2-ΔΔCt法计算基因m RNA表达水平。每个样品采用3个复孔，实验重复3次。本实验所采用的引物序列见表1。