《表1 实时定量PCR引物序列》

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《促红细胞生成素对早期外伤性癫大鼠的保护作用及对bcl-2和caspase-10表达的影响》

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取约80mg脑组织标本，参照说明书提取总RNA（Trizol法），微量分光光度计（美国BIO-RAD公司）检测RNA样品浓度（A值）及纯度（A260/A280值在1.7~2.0）并进行标化。逆转录合成c DNA为模板，β-actin为内参照进行实时定量PCR反应（美国BIO-RAD公司的IQ5 RT-PCR仪）。25μL反应体系中包含12.5μL SYBR GREEN，10μLPCR水，0.25μL上游引物，0.25μL下游引物和2μL c DNA。引物序列见表1。反应条件如下:50℃2min，95℃5min；95℃20s，55℃20s，72℃30s，40个循环。PCR结果采用Ct值比较相对定量法，β-actin为内参照。