《表3 同源重组基因引物序列》

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《诱变酒酒球菌中抗酸候选基因ATPase和FtsH的表达差异分析及功能验证》

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注：序列中的小写字母表示载体上的同源臂，大写字母为目的基因扩增引物序列。

参照分子克隆实验指南第4版中的碱裂解法（大量制备），提取大肠杆菌中的质粒pMG36e，使用限制性内切酶XbaI和HindIII进行双酶切，得到线性质粒。参照重测序结果，设计扩增引物（表3），从抗酸菌株b1中扩增ATPase和FtsH，命名为ATPase1和FtsH1，从酸敏菌株b2中扩增ATPase和FtsH，命名为ATPase2和FtsH2。ATPase PCR反应程序为95℃3 min，95℃30 s，55℃30 s，72℃2 min，35个循环；72℃，10 min；FtsH PCR反应程序为：95℃3 min，95℃30 s，55℃0 s，72℃2.5 min，35个循环；72℃，10 min。