《表1 引物序列及产物长度》

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《紫草素对人结肠癌细胞HCT116自噬和凋亡的影响》

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采用RT-q PCR法检测。取对数生长期HCT116细胞，接种于RPMI 1640完全培养基中，调整细胞密度为1×105个/m L，然后接种至6孔板中，每孔2 m L。细胞分组和给药方法同“2.2”项下，每组均设置3个复孔。培养48 h后，用Trizol试剂提取各组细胞总RNA，采用紫外分光光度法检测RNA浓度及纯度后，将RNA逆转录合成c DNA，并进行PCR扩增。反应体系（共20μL):c DNA模板2μL，Mix 10μL，上、下游引物各0.4μL，dd H2O7.2μL。扩增条件：95℃预变性30 s；95℃变性5 s，60℃退火30 s，72℃延伸20 s，共40个循环。以β-actin作为内参，采用2-ΔΔCt法计算各目标基因m RNA的表达水平。试验重复3次。引物序列及产物长度见表1。