《表1 引物序列及产物长度》

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《缬沙坦对球囊损伤大鼠主动脉内皮Apelin表达影响》


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应用Trizol试剂(美国,Invitrogen公司)提取血管组织中总RNA,检验其纯度。应用RT-PCR试剂盒(德国Rothe公司)逆转录合成cDNA。逆转录条件:37℃、55min;85℃、10min;-20℃储存。根据SYBR Premix Ex Taq(大连宝生物公司)说明书在Light Cycler Real Time PCR扩增仪上进行SYBR Green I实时定量PCR反应,反应条件如下:95℃、10s,60℃、10s,72℃、15s,共40个循环。Apelin及内参照β-actin的引物序列及产物长度见表1。以β-actin为管家基因,应用2-△△Ct法计算目的基因mRNA的相对表达量[9]。