《表1 克隆及q RT-PCR引物》

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《地黄RgMATE6转运蛋白基因的克隆、亚细胞定位与表达分析》

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基于地黄转录组数据库获得的1个Rg MATE基因的Unigene片段，NCBI Blast N比对发现该序列是全长序列，利用Oligo 7.0软件分别从5’和3’末端设计Rg MATE6基因的特异引物（表1）。以所有样品的混合c DNA为模板进行PCR扩增，程序为94℃、3 min；98℃、15 s，61℃、30 s，72℃、2 min，36个循环；72℃、7 min，然后通过琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行检测。利用胶回收试剂盒回收目的片段，并将其连接到Takara公司的p MD18克隆载体上，转化至E.coli DH5α感受态。经抗性筛选后进行菌液PCR检测，将含有与目的片段大小一致的条带的菌液送至上海生工生物工程有限公司进行测序。