《表1 Atr ARFs定量引物》

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《基于苋菜转录组的ARF基因家族鉴定及表达》


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使用天漠生物公司提供的总RNA提取试剂盒(TRIzol)提取上述处理材料的RNA,用SYBR Ex ScriptTM逆转录试剂盒将上述RNA逆转录成c DNA.使用DNAMAN软件对Atr ARF家族成员进行特异性引物设计(表1),以EF1a为内参基因,采用罗氏Light Cycler 480仪器,q RT-PCR反应体系为20μL,参照SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒(Ta Ka Ra),反应条件为95℃预变性30 s,95℃变性10 s,59℃退火20 s,72℃延伸20 s,45个循环.每个样品设置3个生物学重复,检测不同浓度IAA,2,4-D激素处理下Atr ARF在苋菜幼苗中的表达情况,各基因相对表达量则使用2-ΔΔCt法计算得出.并且使用软件Excel进行数据统计、软件SPSS 22.0进行差异显著分析以及软件Origin 2017进行图形绘制.