《表1 定量PCR引物序列》

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《乙烯参与钾对拟南芥缺铁响应的调控》

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试验处理结束后，将新鲜的根系剪下，用超纯水将根系洗干净，并用吸水纸将根系水分吸干，随后将根系放入研钵中加入液氮充分研磨，加入1 mL RNAisoPlus试剂根据产品说明书提取总RNA.提取结束后分别检验样品是否有DNA污染，并测定总RNA的浓度.随后取3μg的RNA用PrimeScript RT reagent kit反转录试剂盒合成cDNA，反转录实验完成后将样品稀释至100μL于-20℃冰箱中保存备用.实时荧光定量PCR釆用SYBR Premix Ex Taq试剂盒，并根据其推荐的反应体系开展实验.qPCR实验反应条件为:95℃预变性1 min，随后在95℃变性15 s、55℃退火15 s、72℃延伸30 s，共进行40个循环，随后进行溶解曲线分析.该实验在MJ Option?RealTime PCR System仪器上进行.以UBQ10作为内参基因，根据2-△△CT计算不同处理间基因的相对表达量，相对表达量相对于对照处理计算.实验涉及的引物序列见表1.