《表1 定量PCR引物序列》

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《免疫瘦素促进大鼠脂肪沉积和PPARγ/SREBP-1基因表达》

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每组血清样本随机抽取6个进行总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和甘油三酯检测（由南京建成生物工程研究所进行检测和分析）。1.3.3基因的定量检测抽取总RNA并反转录成cDNA。将UCP3（肌肉）、Leptin（腹部脂肪）、SREBP-1（肝脏）和PPARγ（下丘脑）基因与对应组织的β-actin基因同时进行定量PCR扩增，记录各个基因扩增的Ct值。荧光定量PCR方法与步骤根据荧光定量PCR试剂盒说明书进行。定量PCR体系:上下游引物（20μmol/L）各0.2μL、反转录产物1μL、ddH2O 8.56μL，SYBR green-Taq 10μL，50×ROX 0.04μL。引物序列见表1。定量循环条件：50℃2 min，95℃2 min，[95℃15 s，60℃（β-actin）或54℃（Leptin）或57℃（UCP3）或58℃（PPARγ）或55℃（SREBP-1）30 s]40个循环。计算公式：Relative Quantification（ddCt）法，基因的平均相对含量=2-averageΔΔCt×100%（Ct值是表示每个PCR反应管内荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数）。