《表1 定量PCR引物序列》

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《藜麦GRF转录因子家族的鉴定及表达分析》

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采用实时荧光定量PCR进一步确定从表达图谱中筛选出来的组织表达特异性较为明显的6个GRF基因的表达模式，所取样品与RNA-Seq所选样品一致。使用TIANGEN试剂盒提取RNA，用Takara的反转录试剂盒合成cDNA第1条链，以各样品的cDNA为模板，浓度统一稀释为100 ngμL-1，进行定量PCR扩增，EF1a为内参基因[38]，各基因特异引物序列见表1。反应体系为20μL，包含10μL SYBR green supermix、5.5μL ddH2O、正反向引物各1μL、2.5μL cDNA。反应条件为95℃预变性10 min；95℃变性10 s，60℃退火30 s，40个循环。采用2–ΔΔCt法计算目的基因的相对表达量。