《表3 用于检测MTB DNA的crRNA序列》
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《PCR扩增技术联合CRISPR-Cas13a系统对MTB DNA检测方法的初步研究》
注IS6110-1crRNA、IS6110-2crRNA、IS6110-3crRNA为用于检测MTB DNA的3条crRNA序列
3.crRNA探针的转录及分离:将扩增后的含crDNA的扩增体系充分混匀后,37℃转录过夜(转录体系见表2),转录为实验所需的3条不同的crRNA,即IS6110-1crRNA、IS6110-2crRNA、IS6110-3crRNA,每条crRNA设置3个复孔,对构建成功的含有MTB DNA的质粒进行检测,对3个复孔的检测结果取均值(3个复孔每一次循环检测的相对荧光强度数值结果相加除以3得到每一循环的结果,共60个循环),比较3条不同crRNA信号的强弱,选择相对荧光强度值最高的1条crRNA用于后续实验检测。具体序列见表3。
图表编号 | XD00215042600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.12.10 |
作者 | 于佳佳、张旭霞、张雨晴、任卫聪、姚丛、李传友、刘毅、唐神结 |
绘制单位 | 北京市结核病胸部肿瘤研究所首都医科大学附属北京胸科医院耐药结核病研究北京市重点实验室细菌免疫室、北京市结核病胸部肿瘤研究所首都医科大学附属北京胸科医院耐药结核病研究北京市重点实验室细菌免疫室、北京市结核病胸部肿瘤研究所首都医科大学附属北京胸科医院耐药结核病研究北京市重点实验室细菌免疫室、北京市结核病胸部肿瘤研究所首都医科大学附属北京胸科医院耐药结核病研究北京市重点实验室细菌免疫室、北京市结核病胸部肿瘤研究所首都医科大学附属北京胸科医院耐药结核病研究北京市重点实验室细菌免疫室、北京市结核病胸部肿瘤研究所首都 |
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