《表3 体外切割过程中Lb Cpf1,crRNA和DNA的摩尔比》

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《LbCpf1基因的原核表达、纯化与体外切割检测》

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上述体外转录获得的crRNA中加入纯化获得的LbCpf1蛋白、无RNase水和NEBuffer 3.1共计10μl，混匀，27℃孵育10min以获得蛋白RNA复合物（RNP），然后加入标靶序列80ng（主要组分摩尔比例如表3所示）。37℃孵育1.5h，95℃高温灭活蛋白10min。2%琼脂糖凝胶电泳检测切割效率。