《表2 目的蛋白及内参蛋白上样体积、一抗及二抗稀释比例》

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《热应激致大鼠睾丸中热休克蛋白A2及几种热休克转录因子的表达变化研究》

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*HSPA2和HPRT上样体积：将各待测样品以1×Loading buffer稀释10倍后，各加5μl

于-80℃取出全部16份大鼠睾丸组织样本，各称取约100毫克置于EP管中，依次加入1ml RIPA裂解液，10μl PMSF，提取总蛋白。将待测样品依次加入上样孔进行电泳，采用半干转法转膜7 min，封闭约1.5 h。根据目的蛋白条带所在位置裁剪PVDF膜后，加入到对应的一抗溶液中，4℃孵育过夜。经TBST洗涤3次（20min/次）后，加入二抗溶液中，4℃孵育约1.5 h。经TBST洗涤3次（20min/次）后，置于Chemi Doc Touch化学发光成像系统中拍照。以HPRT为内参，各目的蛋白表达量以相对灰度值表示。实验过程中，各目的蛋白和内参蛋白上样体积、一抗及二抗稀释比例见表2。