《表2 DREB2A基因DNA序列扩增引物的信息》

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《不同水稻种质中渗透胁迫抗性基因DREB2A的遗传多样性分析》


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根据NCBI发布的DREB2A基因序列(AMB19639.1)。采用在线primer 5.0软件设计引物。PCR扩增反应体系为20μL,含2μL DNA,10×PCRBuffer 2.0μL,10 mmol/L DNTP 0.4μL,25 mmol/l Mg Cl21.6μL,甜菜碱1μL,正反引物各0.5μL,5.0 U/μLTaq聚合酶0.2μL。引物由武汉擎科生物公司合成。PCR扩增程序为:(1)94℃4 min;(2)94℃30 s,65℃30 s,72℃45 s,其中退火(65℃)时每个循环降低1.0℃,共10个循环,;(3)94℃30 s,55℃30 s,72℃45 s,共23个循环;(4)72℃10 min。扩增产物4℃保存,以进行1%琼脂糖凝胶电泳检测。扩增产物送至武汉擎科生物公司测序(见表2)。