《表1 RT-PCR引物序列》

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《祛积通络方对RVO大鼠视网膜HIF-1α、VEGF mRNA表达的影响》


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观察视网膜HIF-1α、VEGF m RNA的表达水平。各组分别于造模后1 h、28 d处死大鼠,显微镜下去除眼前节、晶状体、玻璃体,分离视网膜组织标本。利用RNA提取试剂盒步骤提取总RNA,反转录c DNA,采用Real-time PCR仪进行扩增。PCR引物探针设计[11]见表1。PCR反应体系的配制(总体积25μl):SYBRGreen Mix 10μl、上游引物和下游引物各1μl、dd H2O 11μl、c DNA模板2μl,总体积25μl置于扩增程序。PCR扩增体系设置:95℃×10min(95℃×15s;55℃×45 s)循环40次;冷却后再升温至95℃×15 s;60℃×1 min;95℃×15 s;60℃×15 s。60℃检测信号。