《表1 RT-PCR引物序列》

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《子宫动脉多普勒血流速度测定参数预测葡萄胎新生血管形成和预后转归的超声研究》


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使用Trizol试剂从血清分离总RNA。使用i ScriptTMc DNA合成试剂盒将RNA反转录为第一链互补c DNA。根据制造商的规程,使用Quanti Tect SYBR Green PCR试剂盒确定mRNA的定量。每个反应重复3次。扩增条件如下:在50℃下预孵育2 min,在95℃下10 min进行酶激活,在95℃变性下10 s进行40个循环,在55℃退火下30 s,并在72℃延伸持续30 s。β-actin用作内部对照基因以标准化mRNA水平。RT-PCR引物序列见表1。通过计算机软件测量和计算β-actin RNA和靶基因的循环阈值(Ct)。相对转录水平计算为x=2-ΔΔCT。