《表2 本研究所使用的引物》

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《华贵栉孔扇贝HSP22基因的克隆及表达分析》


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从华贵栉孔扇贝转录组数据中筛选出Cn HSP22c DNA序列。用Primer premier 5.0设计特异性引物H1S/A、H2S/A和H3S/A(表2),通过PCR扩增和测序检测Cn HSP22 c DNA序列的准确性。PCR反应体系总体积为20μL,试剂具体用量为:10×Ex Taq Buffer (含Mg2+)2μL,200μmol/L的d NTP,0.2μmol/L的正反引物,0.2μL Ex Taq酶(5 U/μL)(Ta Ka Ra),1μL c DNA模板,dd H2O补齐至20μL。反应程序为:95℃预变性5 min;随后35个循环:95℃30 s,57℃30 s,72℃20 s;最后72℃处理7 min。