《表1 Ptexp1基因PCR扩增引物》

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《氯吡脲对葛根Ptexp1基因表达的影响及其与产量品质形成的关系》

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在NCBI网站（http://www.ncbi.nlm.nih.gov）非冗余氨基酸数据库搜索“expansin”，获得所有expansin基因序列。将获得的所有序列采用Vector NTI Advance 11.0进行多序列比对分析，在保守性较高的核苷酸序列区域设计简并引物：EXP-F和EXP-R （表1）。用天根Trizol-A+提取液提取葛根叶片的RNA。使用Rever Aid First Strand c DNA Synthesis Kit试剂盒，反转录引物为GZS，反转录为c DNA；用EXP-F和EXP-R进行Ptexp1基因中间片段的PCR扩增。PCR扩增反应体系为25μL:0.20μL Ex Taq酶（5 U/μL），2.5μL 10×Ex Taq Buffer （Mg2+Plus），0.25μL d NTP（10 mmol/L each），1μL EXP-F引物（10μmol/L），1μL EXP-R引物（10μmol/L），1.5μL模板c DNA，17.55μL dd H2O。PCR反应条件为：94℃5 min；94℃30 s，64℃30 s，72℃30 s，每循环退火温度降1℃，9个循环；94℃5 min；94℃30 s，57℃30 s，72℃1 min，30个循环；72℃10 min。