《表1 超滤复性正交实验因素水平表》

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《核糖核酸酶A的错流超滤复性》

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超滤过程的RNase A复性初始浓度、跨膜压力、循环流速是影响超滤效果的最重要因素。目前对RNase A的复性研究中蛋白浓度范围一般为0.2?2.0 mg/mL，且超滤复性过程中RNase A浓度高于0.7 mg/mL易造成蛋白质沉淀，堵塞中空纤维膜；跨膜压力太小易造成变性剂脱除速率较低，导致复性时间过长，而压力太大则会损害中空纤维膜组件，超出膜的操作适用条件；超滤操作的循环流速过低时会引起膜表面严重的浓差极化，流速太高时会造成流体剪切力太大从而破坏蛋白质结构。因此，综合考虑，本研究以RNase A复性初始浓度（A）、跨膜压力（B）和循环流速（C）作为本次实验的实验因子，各设置3个水平，用L9（34）正交实验优化RNase A错流超滤复性条件，并用SPSS 20.0对所有因素进行统计分析。正交实验因素与水平见表1。跨膜压力实际是连接在中空纤维膜两端的进口和出口压力之和的平均值。压力表的单位为psi，实验中通过出口管路上的针型阀调节设定跨膜压力为5.0，10.0，15.0 psi，换算成公制单位即为34.0，68.9，103.0 k Pa。循环流速通过蠕动泵控制：测定选用管路条件下蠕动泵的转速和流量之间的线性关系曲线：y=3.67x （R2=0.997），将实验设定的转速70，100，130 r/min代入上述关系式中，计算得出对应的流量，根据选用的中空纤维膜组件的参数进行换算，得到循环流速分别为654，935，1215 cm/min。