《表1 So F3H基因引物序列设计》

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参照Zheng等(2015)测序数据,将已有的So F3H基因序列经过NCBI网站(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)的Nucleotide BLAST工具比对,在保守区序列设计引物So F3H-1F、So F3H-1R(表1)进行验证,以验证后的序列设计3'RACE outer、inner引物(表1),根据3'RACE试剂盒说明书进行扩增,获得So F3H基因c DNA3'末端序列,与已验证的序列拼接获得该基因的全长c DNA序列;参照上述拼接的c DNA全长序列设计可扩增出完整开放阅读框的正反向引物So F3H-1F、So F3H-2R,分别以c DNA和g DNA为模板进行PCR扩增,其扩增产物经过电泳检测、连接转化和基因测序检测后,最终获得So F3H基因的完整序列。