《表2 基于桑源阴沟肠杆菌特异基因序列设计的LAMP引物组》

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《桑源阴沟肠杆菌LAMP检测方法的建立和应用》

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以桑源阴沟肠特异基因[15]序列（2 191 639～2 193 771 bp）为靶序列，通过在线的LAMP引物设计软件PrimerExplorer V4（http：//primerexplorer.jp/elamp4.0.0/index.html）设计LAMP引物组，见表2。25μL通用型LAMP体系：2×Reaction Mix 12.5μL；10×LAMP Primer Mix 2.5μL（内引物FIP/BIP浓度0.8μmol/L；外引物F3/B3浓度0.2μmol/L）；8 U/μL BstDNA聚合酶1μL；10 ng/μL pEASY-Blunt重组质粒DNA 1μL；加ddH2O至25μL。反应结果通过荧光扩增曲线法、琼脂糖凝胶电泳法及SYBR GreenⅠ显色法3种判定方法筛选合适的引物组。