《表1 梯度洗脱程序:葡萄果实CYP707A基因的克隆与表达分析》

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《葡萄果实CYP707A基因的克隆与表达分析》


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本实验采用试剂盒法提取‘鄞红’葡萄RNA和DNA,利用基因特异性引物(表1)扩增出目的条带(图1),利用Vector NTI 11.5和DNAMAN 8.0进行拼接和翻译,根据生物信息学分析,可知获得的CYP707A基因序列编码区长1 995 bp,可编码653个氨基酸,该序列位于2号染色体上,含有7个外显子,6个内含子;使用UNIPROT (https://www.uniprot.org/uniprot/)预测基因CYP707A,在CYP707A基因家族中属于CY-P707A1基因。利用OFR Finder (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/)预测到Vv CYP707A共有14条开放阅读框,并含有一个从97~1 509碱基位置的最大开放阅读框,其阅读框共有1 413 bp和并编码470氨基酸。