《表1 果糖基转移酶Ao FT的纯化结果》

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《果糖基转移酶AoFT在毕赤酵母中的表达与纯化及其酶学性质研究》


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镍柱亲和层析纯化后的重组蛋白果糖基转移酶Ao FT电泳图如图6所示,其中,M表示蛋白Marker,1和2表示浓度为500 mmol/L的咪唑洗脱样品,3和4表示浓度为50 mmol/L的咪唑洗脱样品,5表示流出样品,6表示上样样品.由图6可以看出,重组果糖基转移酶Ao FT的纯度和浓度较高,分子量大小约为90.0 KD.果糖基转移酶Ao FT的纯化结果见表1.由表1可知,重组毕赤酵母基因工程菌pPICZαA-Ao FT/X33经诱导表达的粗酶液总蛋白质量为164.0 mg,比活力为5.9 U/mg;此粗酶液经硫酸铵盐析沉淀后,得到的总蛋白质量为93.0 mg,比活力为9.4 U/mg;再经镍柱亲和层析后,果糖基转移酶Ao FT的比活力大幅提高至71.4 U/mg,产率达70.6%.