《表2 本研究所用RAPD和ISSR引物序》

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《湖南省饭豆地方种质资源遗传多样性的RAPD和ISSR分析》

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12个RAPD随机引物序列和4个ISSR引物序列由上海生工生物工程有限公司合成，引物名称和序列见表2。PCR反应体系总体积为20μL:3μL模板DNA，2μL 10×Buffer（含Mg2+)，2μL 100μmol/L引物，0.4μL 10mmol/L dNTP，0.4μL2.5 U/μL Taq DNA聚合酶，加ddH2O至20μL，用20μL矿物油覆盖。PCR反应循环参数：94℃预变性5 min，94℃变性45 s，58℃退火30 s，72℃延伸45 s，此后每循环退火温度降低0.5℃，共计10个循环；94℃变性45 s，53℃退火30 s，72℃延伸45 s，共40个循环；72℃延伸10 min，4℃保存；PCR扩增产物利用质量比3%的琼脂糖凝胶进行电泳检测，并在凝胶成像系统中进行读带与拍照。