《表1 引物和探针序列：3种检测方法在中缅边境疟疾无症状感染者筛查中的比较》

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《3种检测方法在中缅边境疟疾无症状感染者筛查中的比较》

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荧光定量PCR采用DNA试剂盒提取滤纸血标本中的疟原虫核酸，参照文献[14]设计间日疟原虫（Plasmodium vivax）和恶性疟原虫（P.falciparum）的特异性引物，分别为Pv-F和Pv-R、Pf-F和Pf-R，具体序列见表1。引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。PCR反应体系（20μl）为：DNA模板2.0μl、正向和反向引物各0.5μl、PCR预混液10.0μl、ddH2O 7μl。反应条件为：95℃3 min；95℃10 s，62℃30 s，72℃30 s，共40个循环；95℃5 s，65℃～95℃（0.5℃）5 s，95℃5 s。本研究重点关注调查对象是否感染，因此只采用了定性结果。根据Ct值大小和溶解曲线峰值判读检测结果，有正常扩增曲线，Ct≤35，且溶解曲线峰值与阳性对照峰值相一致的样品判读为阳性，否则为阴性。