《表2 本研究中引物和探针序列》

《表2 本研究中引物和探针序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《利用TaqMan微流控阵列同步检测多种动物源性成分》


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*:本研究设计的引物探针标注对应目标物种的拉丁名;若引物和探针引用自参考文献,则对应列出参考文献内使用的拉丁名或英文名。“—”参考文献中未说明。

本研究中TaqMan微流控阵列采用的是384孔板的TaqMan低密度阵列(TaqMan low density array,TLDA)(Applied Biosystems公司,美国),每个板上有8列,每列含48孔,每个基因占2个孔,可检测24种(类)对应的物种。在对微流控阵列板进行特异性验证时,板上设置1列阴性对照(Ctrl),即该列的样品不含目标物种的DNA,其他7道(S1~S7)用于样品检测。在对微流控阵列板进行灵敏度验证时,不设阴性对照列,Ctrl列也作为检测列(S0)(图1)。检测的目标物种见图1,包括10类哺乳动物、7种禽类、5种鱼类,以及1个“真核生物”和1个“哺乳动物”的检测孔。“真核生物”可作为检测DNA质量的内参基因;“哺乳动物”可作为当所列物种都为阴性,唯有“真核生物”和“哺乳动物”为阳性时的筛选基因,为下一步检测缩小物种范围。此外,需要说明的是,除了“哺乳动物”和“真核生物”的引物探针外,阵列中其他的引物探针组合所针对的也可能并非一个物种,而是几个物种,如“鳕鱼”的引物探针,可同时检测大西洋鳕、太平洋鳕等。本研究所设计的引物探针所对应的物种以及所有物种的引物探针序列见表2。