《表1 RT-PCR引物序列》

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《BMSC细胞外基质对脂肪间充质干细胞生物学活性的影响》

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将P3代ADSCs按1×105个/孔的密度分别接种于ECM材料包被的6孔板（BM-dECM组）以及普通6孔板（对照组）中，置于细胞培养箱中孵育。分别于3、7、14天时使用TRIzol reagent提取各组细胞总RNA，使用常规方法检测RNA浓度并定量反转录形成c DNA。采用SYBR Green RT-PCR试剂盒检测2组ADSCs中成骨相关基因：特异性AT富集序列结合蛋白2（Specific AT enrichment sequence binding protein2，SATB2）、Runt相关转录因子（Related transcription factor 2，RUNX2）、骨钙蛋白（Osteocalcin，OCN）；成脂标志基因：成脂过氧化物酶体增殖物激活受体γ（Peroxisome proliferator-activated receptor gama，PPAR-γ）、转录调节因子CCAAT增强子结合蛋白α（CCAAT/enhancer binding protein alpha，C/EBPα）；以及成软骨相关基因：聚集蛋白聚糖（Aggrecan，ACAN）、Ⅱ型胶原蛋白-A1（Type II collagen-A1，COL2A1）、性别决定相关基因SOX9（SRY-related high mobility group-box gene 9，SOX9）mRNA的表达情况。每个样本中设置3个复孔同时进行，并重复实验3次。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）作为内参，各基因的相对表达量以在对照组中ADSCs测得的表达量作为基准量1进行比较得到相对定量结果。各引物序列见表1。