《表1 引物序列:利用DNA重组技术生产L-苯丙氨酸的研究》

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《利用DNA重组技术生产L-苯丙氨酸的研究》


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利用PCR技术对rpoA片段进行易错PCR[1],通过Mn+作为诱导剂使其基因产生随机点突变,建立一个基因库,然后再在此基因库中筛选出高产的菌株,因要利用酶切连接的方式将rpoA与ptrc99a相连,选择的是BamHI和Kpn I酶切位点。利用设计好的引物进行PCR,引物序列见表1,采用30μL体系,PCR时可将前变性设为94℃3 min,然后按照94℃变性1 min,45℃退火1 min,72℃延伸1 min,做30个扩增循环即可。