《表1 引物序列:稻瘟病菌丝氨酸/苏氨酸磷酸酶MoPpz1的功能研究分析》

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《稻瘟病菌丝氨酸/苏氨酸磷酸酶MoPpz1的功能研究分析》


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在NCBI数据库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)上找到基因ORF区上游3000 bp的基因序列,然后在网站promoter 2.0(http://www.cbs.dtu.dk/services/Promoter/)进行启动子预测,根据预测的结果、ORF和所选择的载体进行引物设计和载体构建。互补载体构建选用多片段无缝克隆方法,将片段分别进行扩增后,再用多片段无缝克隆酶将多片段进行连接,将构建好的载体转入敲除突变体原生质体中,经分子验证和荧光检测获得正确的回补转化子。该实验所用引物序列见表1。