《表3 引物序列：三斑海马及其混伪品的DNA条形码分子鉴定研究》

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《三斑海马及其混伪品的DNA条形码分子鉴定研究》

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COI基因片段、16 S基因片段、ATP6基因片段均采用相同反应体系：总反应体系为50μL，超纯水35μL，10×PCR buffer 5μL，r Taq酶0.5μL，d NTP Mix5μL，上游引物（F)1μL，下游引物（R)1μL，模板DNA 2.5μL。PCR反应程序：94℃预变性5 min；94℃变性45 s，48～53℃退火1 min，72℃延伸1min，32～35个循环；72℃延伸15 min。扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳，在凝胶成像系统（Genegenus公司）上检测、成像。采用琼脂糖凝胶回收试剂盒纯化回收，纯化后的PCR产物由上海桑尼生物科技有限公司进行测序，使用ABI-3730自动测序仪对各样品的PCR产物进行双向测序，以保证测序结果的准确性，所用引物和PCR引物相同。扩增和测序所用的PCR引物序列见表3。