《表2 所用引物序列：5种楠木木材DNA的提取与条形码鉴定》

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《5种楠木木材DNA的提取与条形码鉴定》

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选取4段DNA条形码作为候选条形码，分别是叶绿体基因组上的matK基因片段、rpoB基因片段、trnL-trnF片段（trnL基因与trnF基因之间的非编码区序列）和trnL-intro（trnL基因内含子区）。以各样品的木材总DNA为模板，分别以4段DNA条形码的对应引物进行PCR扩增，引物序列见表2。反应体系（25μL）为:10×Pfu Buffer with MgSO4 2.5μL，Pfu DNA聚合酶（2.5 U/μL）0.5μL，正反向引物（10μmol/L）各1μL，模板DNA 1μL，无核酸酶水19μL。反应程序如下:94℃预变性5 min，接着每个循环94℃变性30 s，54℃退火30 s，72℃延伸1 min，共35个循环，最后72℃延伸10 min。PCR产物首先采用1%琼脂糖凝胶电泳进行检测，然后采用Biospin PCR产物纯化试剂盒对PCR产物进行纯化，纯化后的PCR产物送至北京六合华大基因科技股份有限公司进行测序。