《表1 本文涉及到的引物:红肉猕猴桃再生体系的建立及DNA条形码鉴定》

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《红肉猕猴桃再生体系的建立及DNA条形码鉴定》


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(3)目的序列扩增及测序:按照第1.2.6节第(1)部分所述方法提取猕猴桃DNA,并以其为模板,以ITS、mat K、SQ1和ML保守序列为引物[表1,matK序列引物根据中华猕猴桃(A.chinensis Planch.)mat K保守序列设计]进行PCR扩增。反应体系:Premix Taq 12.5μL、Primer-F和Primer-R(10μmol·L-1)各0.5μL、DNA template 2μL、双蒸水(ddH2O)11.5μL。反应程序:94°C预变性3 min;94°C变性30 s,55°C退火45 s,72°C延伸45s,32个循环;72°C延伸10 min。PCR产物用10 g·L-1琼脂糖凝胶电泳检测,切胶回收目的条带,送北京诺赛基因公司进行测序。