《表2 DNA条形码引物名称及其序列》

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《中国主栽樱花的分子系统发育分析》


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选用核基因ITS和叶绿体基因trn H-psb A进行DNA条形码分析,2个DNA片段引物序列详见表2。PCR反应体系为50μL,其中含预混合液25μL,模板DNA 1μL,引物对4μL,最后补加dd H2O 20μL。PCR扩增程序:95℃预变性5 min;95℃变性30 s,55或58℃退火30 s(ITS为58℃;trn H-psb A为55℃),72℃延伸1 min,45个循环;最后72℃延伸7 min。扩增完成后直接取5μL PCR产物进行点样,进行琼脂糖凝胶电泳(1.5%),验证扩增结果,之后将有目标条带的PCR扩增产物送到测序公司进行测序。